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石蠟切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素S(thioflavine S)熒光染色試劑盒 產品說明書

發布時間:2022-08-16瀏覽次數:62返回列表

HL80162.1 v.A

 

石蠟切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素Sthioflavine S)熒光染色試劑盒

產品說明書

 

主要用途

 

石蠟切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素Sthioflavine S)熒光染色試劑是一種旨在使用標準化的化學分離石蠟方法和硫磺素S染色技術,與淀粉樣蛋白結合,來分析存檔中的石蠟包埋的組織切片中蘋果綠熒光現象的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于石蠟包埋組織切片的淀粉樣蛋白檢測。廣泛用于淀粉樣蛋白樣疾病的病理生理的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,熒光清晰。

 

技術背景

 

淀粉樣蛋白(AMYLOID)是一種同質性、嗜伊紅性(eosinophilic)、不溶性的纖維蛋白(fibrous protein)聚合體,具有共同的β交叉折疊層(β sheet)組織結構特征,沉積在細胞外。蛋白質錯誤折疊(misfolding),且異常自我聚集將導致淀粉樣變性(amyloidosis),細胞毒纖維沉積,產生組織損傷,進而引起23種不同淀粉樣蛋白綜合癥,超過400種疾病,包括阿茨漢姆癥、巴金森氏癥、II型糖尿病、白內障、朊病毒疾病等。淀粉樣蛋白斑(amyloid plaque)和神經纖維纏結(neurofibrillary tangles;NFT)是淀粉樣蛋白綜合征的病理性特征。硫磺素Sthioflavine S),苯并噻唑(benzothiazole)衍生物,含有至少6種成分,通過脫氫硫甲苯胺(dehydrothiotoluidine)與磺酸(sulfonic acid)的甲基化而成,是常用的淀粉樣蛋白熒光探針。一旦與淀粉樣蛋白纖維結合,在熒光顯微鏡下(激發波長470nm,散發波長510nm),呈現蘋果綠熒光。

  

產品內容

 

蠟液(Reagent A         XX毫升

補水液AReagent B  XX毫升

補水液BReagent C  XX毫升

補水液CReagent D  XX毫升

清理液(Reagent E  XX毫升

氧化液(Reagent F  XX毫升

去干擾液(Reagent G  XX毫升

染色液(Reagent H  XX毫升

強化液(Reagent I  XX毫升

穩定液(Reagent J  XX毫升

產品說明書    1

 

保存方式

 

保存染色液(Reagent H-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent H),避免光照;有效保證3

 

用戶自備

 

小型染色缸:用于石蠟切片的蠟操作

(共聚焦)熒光顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析

 

實驗步驟

 

一、 蠟處理

 

1. 取出10片待測的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時,此步很重要

2. (選擇操作)放進80℃烘箱,孵育30分鐘

3. (選擇操作)室溫下靜置15分鐘

4. 按下表依次放進小染色缸里孵育

 

染色缸 

孵育時間 

XX毫升蠟液Reagent A 

15分鐘

XX毫升蠟液Reagent A

15分鐘

XX毫升蠟液Reagent A

15分鐘

XX毫升補水液AReagent B

3分鐘

XX毫升補水液BReagent C

3分鐘

XX毫升補水液CReagent D

3分鐘

 

5. 小心移去切片上的補水液CReagent D

6. 小心加上XX微升清理液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

7. 室溫下孵育5分鐘

8. 小心移去切片上的清理液(Reagent E

二、樣本染色處理

1. 小心加上XX微升氧化液(Reagent F,鋪滿整個片樣品表面

2. 室溫下孵育5分鐘 

3. 小心移去片上的氧化液(Reagent F

4. 小心加上XX微升清理液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

5. 室溫下孵育1分鐘

6. 小心移去切片上的清理液(Reagent E

7. 小心加上XX微升去干擾液(Reagent G,鋪滿整個片樣品表面

8. 室溫下孵育5分鐘 

9. 小心移去片上的去干擾液(Reagent G

10. 小心加上XX微升清理液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

11. 室溫下孵育1分鐘

12. 小心移去切片上的清理液(Reagent E

13. 小心加上XX微升染色液(Reagent H,鋪滿整個片樣品表面

14. 室溫下孵育8分鐘,避免光照

15. 小心移去片上的染色液(Reagent H

16. 小心加上XX微升強化液(Reagent I,鋪滿整個片樣品表面

17. 室溫下孵育1分鐘 

18. 小心移去片上的強化液(Reagent I

19. 重復實驗步驟1618一次

20. 小心加上XX微升清理液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

21. 室溫下孵育1分鐘

22. 小心移去切片上的清理液(Reagent E

23. 重復實驗步驟2022二次

24. 小心加上XX微升穩定液(Reagent J,鋪滿整個片樣品表面

25. 在4冰箱里孵30分鐘 

26. 小心移去片上的穩定液(Reagent J

27. 小心加上XX微升清理液(Reagent E在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

28. 室溫下孵育1分鐘

29. 小心移去切片上的清理液(Reagent E

30. 封片

31. 即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下激發波長470nm,散發波長510nm觀察:

淀粉樣蛋白:呈現蘋果綠熒光

 

注意事項

 

1. 本產品為50次操作

2. 操作時,須帶手套

3. 本產品友好使用于雙重染色或重疊染色,即首行常規免疫熒光染色,然后進行硫磺素S染色

4. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4條件下,固定16小時,否則造成樣品支離破碎

5. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面

6. 組織細胞染色完成后,即刻進行熒光顯微鏡觀察 

7. 用戶可以使用DAPI濾波器波長進行觀察

8. 本公司提供系列淀粉樣蛋白染色試劑產品

 

質量標準

 

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定熒光清晰

 

使用承諾

 

哈靈生物秉著信譽至上、客戶滿意、質量承諾的宗旨為我們的用戶提供優質產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。

 

 

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